免疫顯色試劑盒（通用4組分）

產(chǎn)品說明書

【產(chǎn)品名稱】

免疫顯色試劑盒（通用4組分）

【產(chǎn)品貨號】

CSK1003-2mL/CSK1003-20mL/ CSK1003-100mL

【主要組成成分】

【預(yù)期用途】

該試劑僅供科研使用。主要用于免疫組織化學(xué)的顯色反應(yīng)。

【檢測原理】

此試劑盒是利用抗體與切片中的靶抗原形成抗原抗體復(fù)合物，再通過HRP酶標(biāo)抗小鼠/兔聚合物（以多聚氨基酸為骨架，辣根過氧化物酶與抗小鼠/兔IgG-Fab’片段形成的多聚合物）與抗原抗體復(fù)合物中的抗體結(jié)合，最后辣根過氧化物酶催化二氨基聯(lián)苯胺（DAB）在抗原部位形成棕色沉淀，并可借助顯微鏡觀察其顏色變化，從而在抗原抗體結(jié)合部位確定組織、細(xì)胞的結(jié)構(gòu)。

【儲存條件及有效期】

2~8℃儲存，避免冰凍。有效期為12個(gè)月。

【檢驗(yàn)方法】

1.檢驗(yàn)所需儀器、設(shè)備

移液器、免疫組化油筆、計(jì)時(shí)器、干燥箱、孵育盒、染色架、蓋玻片、光學(xué)顯微鏡、洗瓶。

2.溶液配制

DAB顯色液：使用DAB底物緩沖液將DAB底物（20X）稀釋20倍。避光存放，現(xiàn)配現(xiàn)用。

3.試驗(yàn)溫度條件

室溫，18~25℃

4.實(shí)驗(yàn)步驟

4.1脫蠟和水化

石蠟切片置于新鮮的二甲苯中，浸泡2次，10min/次，；

除去多余的液體后，置于無水乙醇中，浸泡2次，5min/次，；

除去多余的液體后，置于95%乙醇中，浸泡5min；

除去多余的液體后，置于85%乙醇中，浸泡5min；

自來水沖洗3次, 3min/次。

4.2抗原修復(fù)：參照一抗抗體說明書進(jìn)行。

4.3加內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑

將抗原修復(fù)后的切片用自來水沖洗3次，3min/次，用油筆圈定玻片上的待測組織區(qū)域，TBS清洗液沖洗1次，3min/次；除去TBS清洗液，在樣本區(qū)域加入80-100μL（試劑量視切片大小，以完全覆蓋切片組織為宜，前后試劑量保持一致，下同）內(nèi)源性過氧化酶封閉劑，室溫孵育5min；TBS清洗液沖洗3次，3min/次。

4.4加抗體

除去TBS清洗液，加入80-100μL一抗，室溫孵育60min；TBS清洗液沖洗3次，3min/次。

4.5加HRP酶標(biāo)二抗聚合物

除去TBS清洗液，加入80-100μL酶標(biāo)二抗聚合物，室溫孵育30min。TBS清洗液沖洗3次，3min/次。

4.6顯色

除去TBS清洗液，加入80-100μL新鮮配制的DAB顯色液，室溫孵育5min。

4.7復(fù)染

自來水沖洗，加80-100μL蘇木素，室溫孵育1-3min；自來水沖洗返藍(lán)。

4.8脫水、透明、封片

置于85%乙醇中，浸泡2min；

置于95%乙醇中，浸泡2min；

置于無水乙醇中，浸泡2次,2min/次；

二甲苯透明，浸泡2次,2min/次；

中性樹膠和蓋破片封片。

4.9光學(xué)顯微鏡閱片

【檢驗(yàn)方法的局限性】

1. 免疫組織化學(xué)試驗(yàn)中，試劑選取、樣本固定、處理，切片準(zhǔn)備及染色結(jié)果解釋等都必須進(jìn)過嚴(yán)格的專業(yè)培訓(xùn)；專業(yè)的操作人員、經(jīng)過認(rèn)證的實(shí)驗(yàn)室將有助于實(shí)驗(yàn)檢測過程的標(biāo)準(zhǔn)化，從而減少由于外界因素造成的染色偏差。
2. 染色前組織的處理直接影響染色效果。不恰當(dāng)?shù)墓潭?、冰凍、熔化、清洗、烘干、切片或被其他組織或液體污染都會造成假陽性、抗體定位不準(zhǔn)確或假陰性結(jié)果。固定和包埋方法的不同或組織內(nèi)部的不規(guī)則也可能造成異常的染色結(jié)果。
3. 過度或不足的復(fù)染都會影響結(jié)果的正確解釋。
4. 該試劑盒僅對10%中性緩沖福爾馬林固定石蠟包埋的組織進(jìn)行了驗(yàn)證，不得用于其它樣本類型或流式細(xì)胞檢測等其它用途。

【注意事項(xiàng)】

1. 該試劑盒僅供科研使用。
2. 實(shí)驗(yàn)開始前，應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書。
3. 該試劑必須是經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn)的專業(yè)人員在有效期內(nèi)使用，如發(fā)現(xiàn)漏液、污染或變質(zhì)，請勿使用。
4. 該試劑使用應(yīng)采取適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)措施，避免試劑同皮膚和眼睛接觸，禁止口吸試劑，若皮膚、粘膜等身體部位接觸該試劑，及時(shí)使用大量水沖洗。
5. 抗原修復(fù)、孵育時(shí)間、溫度條件或應(yīng)用其他方法均可能導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。
6. 樣本室溫保存時(shí)，應(yīng)在封存7天內(nèi)染色。否則會因?yàn)闀r(shí)間長久，導(dǎo)致組織中抗原退變產(chǎn)生假陰性結(jié)果。
7. DAB有潛在致突變作用，在使用過程中應(yīng)特別注意安全防護(hù)措施外，對其使用后的廢液存放和去毒性處理也應(yīng)符合相關(guān)法律法規(guī)要求。
8. 該試劑是否應(yīng)用于非福爾馬林固定組織還未得到證實(shí)。
9. 【基本信息】生產(chǎn)企業(yè)：賽諾特生物技術(shù)（蘇州）有限公司聯(lián)系地址：蘇州市高新區(qū)富春江路188號7號樓701室聯(lián)系方式：0512-66616037【生產(chǎn)日期及使用期限】詳見標(biāo)簽

免疫顯色試劑 . 專利技術(shù)

在免疫組化技術(shù)中，二抗一直是技術(shù)壁壘最高的產(chǎn)品，賽諾特生物在美國組建高精尖研發(fā)團(tuán)隊(duì)，通過5年的努力，突破了微聚合物骨架、HRP層疊、Fab'標(biāo)記、偶聯(lián)化學(xué)四大核心技術(shù)。

2018年新型MicroStacker?微聚合物層疊法二抗檢測試劑盒成功上市， 并獲得國家發(fā)明專利，成為國內(nèi)首創(chuàng)微聚合物骨架二抗，打破進(jìn)口壟斷。

MicroStacker?通用型

鼠、兔通用免疫組化顯色試劑盒

微聚合物結(jié)構(gòu)緊湊，穿透力強(qiáng)，靈敏度更高

采用Fab'抗體片段標(biāo)記，避免非特異性著色

采用新型化學(xué)偶聯(lián)技術(shù)，試劑更穩(wěn)定

適用于石蠟組織中鼠源和免源抗體的手工免疫組化檢測

MicroStacker?增強(qiáng)型

鼠、兔通用二步增強(qiáng)法

與通用型檢測系統(tǒng)相比，通過特別設(shè)計(jì)獲得更高靈敏度，并且增加一步放大劑，進(jìn)一步擴(kuò)增一級抗體信號；適用于石蠟組織中鼠源和免源抗體的手工免疫組化檢測；適用于表達(dá)量低的抗原，親和力低的抗體

MicroStacker? RX多聚HRP酶標(biāo)二抗聚合物

染色效果對比

COMPARE

研發(fā)人員通過在微骨架上實(shí)現(xiàn)過氧化物酶和抗體的分層有序組裝，以及對多聚物中各組分比例和結(jié)構(gòu)組成的精確調(diào)控和優(yōu)化，實(shí)現(xiàn)了染色較高的靈敏度和特異度。本款手工免疫顯色試劑，分為鼠免通用型二抗，羊抗鼠二抗和羊抗兔二抗。

1、本品廣泛應(yīng)用于石蠟組織切片和冰凍切片的免疫組化染色。
2、適用于鼠源一抗和(或)免源一抗的檢測放大。

MicroStacker?二抗聚合物特點(diǎn)：

• 提升靈敏度:采用微聚合物骨架和HRP酶層疊技術(shù)，更小骨架結(jié)構(gòu)，以及酶和抗體分層堆積，使得多聚物結(jié)構(gòu)更加緊湊，位阻小，穿透力強(qiáng)，顯著提升染色靈敏度。
• 提升特異性:Fab’片段標(biāo)記，體積更小，避免了因Fc片段造成的非特異性染色。非生物素檢測系統(tǒng)，避免因組織中內(nèi)源性生物素造成的背景染色。
• 提升穩(wěn)定性:采用新型偶聯(lián)化學(xué)，酶和抗體組分比例精確可控，多聚物結(jié)構(gòu)也更加穩(wěn)定，使得染色結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。

免疫組化顯色試劑盒訂貨信息

貨號	名稱	規(guī)格	組分	目錄價(jià)
CSK1003-2mL	免疫顯色試劑盒（通用4組分）	20次	內(nèi)源性過氧化物酶封閉劑 HRP酶標(biāo)記山羊抗鼠/兔試劑 DAB底物（20X） DAB底物稀釋緩沖液	600
CSK1003-5mL	免疫顯色試劑盒（通用4組分）	50次	內(nèi)源性過氧化物酶封閉劑 HRP酶標(biāo)記山羊抗鼠/兔試劑 DAB底物（20X） DAB底物稀釋緩沖液	1375
CSK1003-10mL	免疫顯色試劑盒（通用4組分）	100次	內(nèi)源性過氧化物酶封閉劑 HRP酶標(biāo)記山羊抗鼠/兔試劑 DAB底物（20X） DAB底物稀釋緩沖液	2675
CSK1003-20mL	免疫顯色試劑盒（通用4組分）	200次	內(nèi)源性過氧化物酶封閉劑 HRP酶標(biāo)記山羊抗鼠/兔試劑 DAB底物（20X） DAB底物稀釋緩沖液	5031
CSK1003-100mL	免疫顯色試劑盒（通用4組分）	1000次	內(nèi)源性過氧化物酶封閉劑 HRP酶標(biāo)記山羊抗鼠/兔試劑 DAB底物（20X） DAB底物稀釋緩沖液	17063