發貨周期：

干冰凍存管運輸3天（5×10^5?cells/凍存管x1）

常溫運溫1-2周發貨 (5×10^5?cells/cells/T25培養瓶）

（推薦T25瓶，復蘇發貨1-2周）

血管內皮細胞有助于維持血管平衡。血管內皮細胞產生并分泌凝血和纖維蛋白溶解系統的激活劑和抑制劑。此外，它們還介導血小板的粘附和聚集。內皮細胞還會釋放調節細胞增殖和控制血管壁張力的分子。人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）是體外研究內皮細胞過程最常用的細胞類型。

海星生物提供的臍靜脈內皮細胞系(HUVEC細胞系)取自自然分娩、健康的新生兒臍帶組織經SV40T和hTERT轉化，具有良好的傳代能力及性狀表現。

細胞名稱：人臍靜脈內皮細胞系(HUVEC細胞系)(經免疫熒光檢測及血管形成能力驗證)

人臍靜脈內皮細胞系(HUVEC細胞系)為有限細胞系，使用海星配套完培，按照1：2傳代，收貨后承諾能再傳5代。

細胞簡稱：HUVEC

產品貨號：TCH-C406

種屬來源：人

組織來源：臍帶組織

疾病特征：—

細胞形態：內皮細胞樣

生長特性：貼壁生長

培養體系：內皮細胞培養基礎培養基＋5% FBS＋內皮細胞培養添加劑+1% P/S

消化時間：胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)含酚紅(胰酶)在37℃消化1-2min。

注：不同品牌胰酶不同細胞密度消化時間略有區別，以大部分細胞變圓脫落為準。

配套培養基貨號：TCH-G406

傳代比例：1:2，每2-3天換液一次

傳代周期：48-72 h

培養條件：氣相：95%空氣+5%CO₂，溫度：37℃

凍存條件：60%基礎培養基+30%FBS+10%DMSO，液氮儲存

質量檢測：細菌、真菌、支原體檢測均為陰性

人臍靜脈內皮細胞系(HUVEC細胞系) 傳代圖片：

人臍靜脈內皮細胞系(HUVEC細胞系) 免疫熒光鑒定：

人臍靜脈內皮細胞系(HUVEC細胞系) 血管形成能力驗證：

人臍靜脈內皮細胞系(HUVEC細胞系) 成管熒光驗證：

實驗方法：

1.?將對數生長期的HUVEC細胞系進行無血清饑餓處理16-24h。

2.?從冰箱中提前取出基質膠放入4?℃的冰箱中過夜解凍，移液管或槍頭需提前預冷，使用預冷的移液管或槍頭混合基質膠至均勻狀態。

3.?稀釋基質膠，使用培養液將基質膠1：1混合均勻稀釋到10 mg/mL，可根據實際情況進行調整。將完全解凍的基質膠放至在冰上，翻轉幾次以混合內容物后，48孔板中每孔加入150-200 μL。

4.?將加入了基質膠的48孔板轉移到4?℃冰箱中，在平整狀態下孵育過夜，使基底膜形成凝膠并自流平，第二天使用前提前置于37?℃使基質膠固化。

5.?對饑餓處理后達到80%融合的HUVEC細胞進行消化，離心，計數。

6.?將細胞重懸在各組別培養基中，使濃度為每毫升含2~3E5個細胞的單細胞懸液。48孔板中每孔加入含待測樣本的200 μL細胞懸液（含4~6E4個細胞）。

7.?將孔板置于37?℃，5%CO₂，90%濕度條件的培養箱培養，并在不同時間點拍照觀察，一般3-12小時可見血管網絡形成，成管時間與細胞狀態密切相關。

成血管實驗注意要點：

1.?基質膠(貨號：GUTK-R002-01)非常容易形成凝膠狀態，在解凍過程中全程放在4?℃，（可提前一天放置在4?℃冰箱解凍預冷，準備一個-20?℃的冰盒，將基質膠放置在冰盒上），在48孔板移液過程中全程在冰上操作。因此移液槍頭也需要提前放至4?℃預冷，也可將需要預冷的材料放至-20?℃急凍。

2.?在向孔板中鋪膠時，小心且垂直地將液體移入孔中，避免基質膠液體中出現氣泡。如果出現氣泡，將孔板在4?℃下以300×g離心10 min，確保離心機預冷至4?℃。實驗過程中的所有耗材均需要提前放置在4?℃冰箱中預冷。

3.?在37?℃凝膠期間不要搖晃平板，因為這將導致凝膠表面不均勻。

4.?凝膠形成后先觀察凝膠的形成狀態，常會出現類似沙丘的隆起和溝壑，這時需要靜置更長的時間，確保凝膠表面是平整均勻的狀態后再進行實驗。

5.?在接種細胞時，細胞活率要大于95%才可用于實驗并得到一個準確的結果。

6.?當將細胞添加到孔中時，要確保細胞混合均勻，因為細胞密度對管的形成有影響。在加入細胞時，不要接觸凝膠的表面，并緩慢地加入細胞懸液，以免損傷凝膠材料。

7.?在實驗的第一個小時，不要搖動平板或將其從細胞培養箱中取出。在顯微鏡下觀察平板時，不要在細胞培養箱外保存超過一兩分鐘。

8.?如需對成管進行熒光染色，熒光孵育時注意孵育時間，時間過長可能導致細胞彌散。

人臍靜脈內皮細胞系(HUVEC細胞系)培養注意事項

1.?人臍靜脈內皮細胞系(HUVEC細胞系)的培養基：

①?細胞狀態對培養基更換敏感，請使用海星配套完培(貨號：TCH-G406)，否則會影響細胞狀態及傳代能力。

②?人臍靜脈內皮細胞系(HUVEC細胞系)完全培養基中會少量沉淀物屬于正常現象，不影響使用，不建議過濾將其去除，將會影響培養基的有效成分。

2.?人臍靜脈內皮細胞系(HUVEC細胞系)的傳代能力：

①?該細胞為有限傳代細胞系，使用海星配套完培，按照1：2傳代，收貨后承諾能再傳5代。

②?細胞培養中會有少量黑色顆粒及死細胞碎片的產生，屬正常現象，可通過換液去除即可，不影響細胞培養。

③?該細胞為有限細胞系，建議收到后盡快進行實驗，不建議進行凍存保種。

3.?人臍靜脈內皮細胞系(HUVEC細胞系)的消化：

①?該細胞對胰酶敏感;胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)含酚紅(胰酶)（貨號：GUTP-R002）在37 ℃消化1-2min。不同品牌胰酶不同細胞密度消化時間略有區別，以80%細胞變圓脫落為準，如果消化全部脫離容易出現消化過度，影響細胞狀態。

人臍靜脈內皮細胞系(HUVEC細胞系)參考傳代密度及消化程度：

②?該細胞傳代后第二天會出現少量漂浮細胞，屬于正常現象，換液即可去除，不影響細胞培養。

HUVEC?已發表過的文章：

IF=9.8?Gao R, Jiang Z, Wu X, et al. Metabolic regulation of tumor cells exposed to different oxygenated polycyclic aromatic hydrocarbons[J]. Science of The Total Environment, 2024, 907: 167833.

IF=8.1?Wang Z, Zhao P, Tian K, et al. TMEM9 promotes lung adenocarcinoma progression via activating the MEK/ERK/STAT3 pathway to induce VEGF expression[J]. Cell Death & Disease, 2024, 15(4): 295.

IF=5.9?Liu Q, Xie J, Zhou R, et al. A matrix metalloproteinase-responsive hydrogel system controls angiogenic peptide release for repair of cerebral ischemia/reperfusion injury[J]. Neural Regeneration Research, 2025, 20(2): 503-517.

IF=3.8?Shan Y, Xia Z, An M, et al. Construction and application of H1R ligand screening materials based on SMA stabilization and His-tag covalent immobilization of membrane proteins[J]. Journal of Chromatography A, 2024: 465057.

IF=3.6?Su J, Cheng J, Hu Y, et al. Transfer RNA-derived small RNAs and their potential roles in the therapeutic heterogeneity of sacubitril/valsartan in heart failure patients after acute myocardial infarction[J]. Frontiers in Cardiovascular Medicine, 2022, 9: 961700.